下调血管内皮生长因子A对食管癌ECA-109细胞的辐射增敏作用

目的:下调食管癌ECA-109细胞的血管内皮生长因子A(VEGFA)表达，观察其辐射敏感性的改变并初步探讨其发生机制。方法:将食管癌ECA-109细胞分成VEGFA转染组、空载组、X射线组和VEGFA转染组联合X射线组。运用qPCR法检测VEGFA基因的表达；Western blot法检测VEGFA蛋白的表达；细胞增殖实验(CCK8法)测定细胞的增殖变化；克隆形成法分析不同照射剂量(0、2、4、6、8 Gy)细胞的辐射敏感性；流式细胞术分析细胞凋亡变化；免疫荧光法检测γ-H2AX焦点的数量。结果:ECA-109细胞VEGFA转染组与空载组比较，VEGFA基因表达明显减少( t＝11.98， P<0.05)、VEGFA蛋白表达显著下调( t＝12.38， P<0.05)；ECA-109转染组细胞相较于空载组细胞，其增殖( A450值)明显受到抑制( t＝2.78、7.25、21.93、13.21， P<0.05)；与空载组比较，VEGFA转染组ECA-109细胞的 D0、 Dq、 SF2值下降( t＝5.83、8.56、7.68， P<0.05)，放射增敏比 SERD0、 SERDq分别为1.41、2.09，凋亡比例明显增加、且联合X射线后ECA-109细胞的凋亡比例进一步增加( t＝17.63、22.48、33.87， P<0.05)；ECA-109细胞VEGFA转染组和空载组在X射线照射后2 h内细胞核形成的γ-H2AX焦点数量均明显增加，24 h后空载组细胞核的γ-H2AX焦点数量恢复照射前水平，而转染组中的γ-H2AX焦点数量仍高于照射前水平( t＝7.00， P<0.05)。 结论:下调VEGFA能抑制食管癌细胞的增殖，减少细胞集落形成并促进其凋亡，增加食管癌ECA-109细胞的辐射敏感性，其机制与DNA损伤修复密切相关。