LncRNA CRNDE靶向miR-384影响结直肠癌细胞放射敏感性的研究

目的 研究长链非编码RNA (Lnc RNA)结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE)对结直肠癌细胞放射敏感性的影响及其机制.方法 以结直肠癌HT-29细胞作为体外研究对象,转染CRNDEshRNA,实时定量PCR测定干扰效果.以8GyX射线照射转染CRNDE shRNA后的HT-29细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法和流式细胞术分别检测细胞增殖和凋亡水平.平板克隆实验检测放射敏感性.生物信息学软件预测CRNDE与miR-384有互补结合位点,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系.将CRNDE shRNA和miR-384 inhibitor共转染至HT-29细胞中,以8 Gy剂量照射处理,MTT和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡变化.结果 CRNDE shRNA能够降低HT-29细胞中CRNDE表达水平(1.00±0.08vs.0.42±0.06,t=10.051,P＜0.05).CRNDE shRNA和放射均可以抑制HT-29细胞增殖并诱导细胞凋亡,并且二者联合具有协同作用[凋亡率:(2.27±0.13)％、(23.58±2.35)％、(26.91±2.81)％、(36.84±3.24)％,F=24.66,P＜0.05;吸光度(A)值:0.45±0.06、0.30±0.02、0.28±0.03、0.20±0.02,F=106.21,P＜0.05]. CRNDE shRNA转染后可以提高HT-29细胞放射敏感性,放射增敏比为1.374.CRNDE靶向负调控miR-384表达.miR-384 inhibitor能够拮抗CRNDE shRNA对放射处理的结直肠癌细胞增殖抑制和凋亡促进的作用.结论 下调LncRNA CRNDE表达可增强结直肠癌细胞的放射敏感性,其作用机制与靶向负调控miR-384表达有关.