靶向前列腺癌细胞的EpCAM特异性核酸适配体的细胞SELEX筛选

目的 探讨利用细胞指数富集配基的系统进化(SELEX)技术筛选特异性靶向并结合上皮细胞黏附分子(EpCAM)阳性前列腺癌(PCa)细胞的适配体的方法.方法 设计随机 DNA 文库,以表达 EpCAM分子的人 PCa 细胞为靶标,利用细胞 SELEX技术筛选 EpCAM特异性DNA适配体.经过 1 2 轮体外筛选,对 DNA产物进行克隆和测序,用流式细胞术、细胞免疫荧光技术检测适配体对靶细胞特异性结合的能力.结果 从随机单链DNA文库中筛选出的2 条EpCAM适配体Ep1 和Ep2 均能特异性结合人PCa细胞 LNCaP、PCG3 、DU145 和慢病毒表达载体 pCDHGEpCAM转染的 HEK2 9 3T 细胞,而不能结合空载体 pCDH 转染的HEK293T细胞,且Ep1 对各细胞的结合率分别为61.0%、74.3%、59.1%、60.3%、5.4%,Ep2对各细胞的结合率分别为65.1%、77.8%、54.2%、5 8.3%、3.3%.结论 经细胞SELEX技术筛选的EpCAM适配体能特异性识别并靶向EpCAM阳性的PCa细胞,有望为PCa的特异性诊断和靶向性治疗提供新思路,同时也为其他恶性肿瘤特异性诊疗方案的研究奠定实验基础.