MiR-148a对肺癌细胞放射敏感性的影响
International Journal of Radiation Medicine and Nuclear Medicine(2018)
Abstract
目的 探讨miR-148a对肺癌A549、H460以及H1299细胞放射敏感性的影响.方法 根据不同的处理方法,分别按以下方式将肺癌A549、H460和H1299细胞进行分组.(1)将肺癌A549和H460细胞分为3组:空白对照组、4Gyγγ射线照射组和8 Gy γ射线照射组.采用实时定量PCR检测miR-148a的表达水平;(2)将肺癌A549细胞分为2组:空白对照组、miR-148a转染组;同时,将肺癌H460细胞分为2组:空白对照组、anti-miR-148a转染组.分别对转染2组细胞进行不同剂量的γ射线照射,并采用克隆形成实验方法来检测细胞增殖;(3)将肺癌A549和H1299细胞分为3组:空白对照组、miR-148a单独处理组、miR-148a和雌激素受体(ER)共转染组.分别对3组细胞进行不同剂量的γ射线照射,并采用克隆形成实验方法检测细胞生长情况.采用Student t-test对数据进行统计学分析,P<0.05表示差异有统计学意义.结果 实时定量PCR实验结果显示,γ射线照射能够显著下调肺癌A549和H460细胞中miR-148a的表达水平.克隆形成实验结果显示,与空白对照组相比,miR-148a转染能够显著增强肺癌A549细胞的放射敏感性,差异有统计学意义(t=12.16,P<0.01),而anti-miR-148a转染能够显著降低肺癌H460细胞的放射敏感性,差异有统计学意义(t=11.93,P<0.01).同时,miR-148a过表达可以明显下调肺癌A549细胞中ER的mRNA及蛋白表达水平;而anti-miR-148a能够显著上调肺癌H460细胞中ER的mRNA及蛋白表达水平.另外,与miR-148a单独处理组相比,miR-148a和ER共转染组中miR-148a对肺癌A549和H1299细胞增殖的影响显著降低,差异有统计学意义(t=1 1.34、12.68,均P<0.01).结论 照射可以诱导miR-148a的表达水平降低,人为过表达miR-148a能够抑制ER的蛋白表达水平,进而降低肺癌A549和H1299细胞的增殖能力,同时增强其放射敏感性.
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Key words
Lung neoplasms,Radiation tolerance,MiRNA-148a,Estrogen receptor,Cell proliferation
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