miR-124-3p表达水平与结直肠癌的关系及其逆转耐奥沙利铂HCT116细胞耐药性研究

目的 研究miR-124-3p在结直肠癌组织和癌旁正常组织中的表达差异及其通过铁坏死途径逆转奥沙利铂HCT116细胞耐药性的作用.方法 (1)采集20例结直肠患者的癌组织和癌旁正常组织,以实时荧光定量-PCR法和免疫印迹法分别检测这两种组织中miR-124-3 p基因和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX4)蛋白的表达水平.(2)将耐奥沙利铂HCT116细胞分为4组:对照组、奥沙利铂组、奥沙利铂合并miR-124-3p处理组和奥沙利铂合并miR-124-3p+铁坏死抑制剂组.预先用miR-124-3p或铁坏死抑制剂处理细胞后,再用奥沙利铂处理细胞24h,通过MTT法检测耐奥沙利铂HCT116细胞活性,以克隆形成实验检测细胞克隆形成能力.结果 (1)癌旁正常组织和癌组织中miR-124-3p基因的相对表达量分别为9.89±2.44和1.10±0.15;这两者的GPX4蛋白相对表达量分别为0.91±0.19和6.77 ±2.11,两者间比较差异均有统计学意义(均P＜0.01).(2)耐药HCT116细胞中,对照组、奥沙利铂组和奥沙利铂合并miR-124-3p组的细胞活力分别为(100.00±0.00)％,(113.40±13.01)％和(39.87±3.87)％;这3组的克隆形成能力分别为(100.00±0.00)％,(92.46±23.26)％和(37.72±11.71)％,奥沙利铂组与奥沙利铂合并miR-124-3p组相比,上述指标的差异均有统计学意义(均P＜0.01).奥沙利铂合并miR-124-3p处理组和奥沙利铂合并miR-124-3p+铁坏死抑制剂组的细胞活力分别为(33.88±5.44)％和(84.87±19.68)％,这2组的克隆形成能力分别为(25.67±14.38)％和(81.65±6.10)％,2组间比较差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论 在结直肠癌组织中,miR-124-3p基因的低表达和GPX4蛋白的高表达可能与结直肠癌发病有关;在耐奥沙利铂HCT116细胞中,高表达miR-124-3p基因可通过降低GPX4蛋白的表达诱导铁坏死途径而逆转其耐药性.