那可丁通过影响凋亡蛋白增强顺铂对A549顺铂耐药细胞的敏感性

目的 研究那可丁增强A549/顺铂(DDP)耐药细胞株对顺铂敏感性的机制.方法 用CCK-8法检测不同浓度DDP处理A549与A549/顺铂耐药细胞后的细胞活力(OD值),计算耐药系数;不同浓度DDP联合那可丁处理DDP耐药细胞,计算那可丁逆转耐药倍数.将A549/顺铂细胞分为4组:空白组、顺铂组、那可丁组和联合组(顺铂组+那可丁组).用空白对照、顺铂(20 mg·L-1)、那可丁(10μmol·L-1)和和顺铂联合那可丁分别处理DDP耐药细胞.用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;用蛋白质印迹法检测B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bax)和Bcl-2相关抗凋亡蛋白1(Bag-1)的蛋白相对表达水平(灰度值).结果 耐药细胞的耐药系数为5.8;那可丁顺铂耐药逆转倍数为2.0.空白组、那可丁组、顺铂组和联合组的细胞凋亡率分别为(3.90±1.84)％,(5.60±1.44)％,(23.90±2.15)％和(56.90±2.04)％;那可丁组、顺铂组和联合组与空白组比或联合组分别与那可丁组及顺铂组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01).空白组、那可丁组、顺铂组和联合组的的Bcl-2蛋白相对表达水平分别为0.93±0.02,0.82±0.03,0.69±0.17和0.56±0.03;这4组的Bag-1蛋白相对表达水平分别为1.00±0.03,0.93±0.02,0.78±0.01和0.64±0.02;这4组的Bax蛋白相对表达水平分别为0.60±0.01,0.91±0.02,1.07±0.03和1.15±0.06.那可丁组、顺铂组和联合组与空白组比较,抗凋亡蛋白Bcl-2和Bag-1的表达均明显下降,而促凋亡蛋白Bax的表达明显增高,差异均有统计学意义(均P<0.01);联合用药组分别与那可丁组和顺铂组比较,上述指标的差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).结论 那可丁可增加A549/顺铂耐药细胞对顺铂的敏感性,可能途径是通过调节Bcl-1、Bax及Bag-1等凋亡相关蛋白的表达,促进了A549/顺铂细胞的凋亡.