雷公藤甲素通过抑制P13 K/AKT通路信号转导对结肠癌细胞自噬的影响

目的 研究雷公藤甲素对结肠癌HCT116细胞P13K/AKT通路的抑制作用及对HCT116细胞自噬的影响.方法 低、中、高剂量实验组结肠癌HCT116细胞分别以终浓度为20,40,80 nmol·L-1的雷公藤甲素处理,对照组细胞以等量生理盐水处理,分别干预24,48,72 h.以单丹磺酰尸胺(MDC)染色观察细胞自噬,以蛋白免疫印迹(WB)法检测HCT116细胞自噬相关蛋白及PIK3/AKT通路相关蛋白表达情况.结果 对照组及低、中、高剂量实验组自噬细胞比例分别为(0.09±0.01)％,(6.47±0.12)％,(15.86±1.27)％,(23.01±1.46)％;微管轻链Ⅰ蛋白3-Ⅰ型(LC3Ⅰ)蛋白相对表达量分别为0.98±0.12,0.91±0.09,0.62±0.08,0.49±0.09;微管轻链Ⅰ蛋白3-Ⅱ型(LC3-Ⅱ)蛋白相对表达量分别为0.33±0.06,0.41±0.07,0.58±0.09,0.79±0.11;Beclin-1蛋白相对表达量分别为0.41±0.06,0.74±0.07,0.98±0.11,1.02±0.12;磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白相对表达量分别为0.83±0.12,0.76±0.10,0.71±0.09,0.62±0.06;P13K蛋白相对表达量分别为1.21±0.14,1.07±0.11,0.89±0.09,0.47±0.05.低、中、高剂量实验组自噬细胞比例及LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白相对表达量较对照组升高,且随雷公藤甲素作用浓度增大呈逐渐升高趋势(P<0.05);低、中、高剂量实验组LC3-Ⅰ蛋白及p-AKT、P13K蛋白相对表达量较对照组降低,且随雷公藤甲素作用浓度增大呈逐渐降低趋势(P<0.05).结论 雷公藤甲素可通过抑制P13K/AKT通路信号转导诱导结肠癌HCT116细胞自噬,且具有明显剂量依赖性.