谷胱甘肽过氧化酶4对肺腺癌细胞厄洛替尼敏感性的影响及相关机制

目的 探究谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)对肺腺癌细胞厄洛替尼敏感性的影响及相关机制.方法 将人肺腺癌细胞系PC9分为5组:对照组、抵抗组、随机组、干扰1组和干扰2组.以0.01～2.00μmol·L-1厄洛替尼梯度诱导构建厄洛替尼抵抗细胞作为抵抗组,以相同时间与体积的磷酸盐缓冲液(PBS)处理PC9细胞作为对照组;用慢病毒转染无意义序列、GPX4干扰序列1#和干扰序列2#载体于抵抗组细胞中,分别为随机组、干扰1组和干扰2组.以MTT比色法检测各组细胞厄洛替尼半抑制浓度(IC50),以实时荧光定量PCR技术检测各组细胞GPX4和缺氧诱导因子1α(Hif1α)的基因表达水平,以蛋白免疫印迹技术检测GPX4和Hif1α的蛋白表达水平.结果 对照组、抵抗组、随机组、干扰1组和干扰2组细胞厄洛替尼IC50分别为(163.4±18.6),(552.7±49.0),(592.7±67.3),(308.2±39.4)和(273.6±41.1)nmol·L-1;上述这5组的GPX4 mRNA表达水平分别为0.33±0.02,0.65±0.06,0.72±0.08,0.22±0.02和0.25±0.02;上述这5组的Hif1αmRNA表达水平分别为0.21±0.01,0.49±0.06,0.54±0.05,0.33±0.03和0.35±0.03.上述指标:对照组与抵抗组相比、或者干扰1组和干扰2组与随机组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05).蛋白表达变化与基因水平一致.结论 GPX4可通过上调Hif1α表达,促进肺腺癌细胞上皮间充质转化进程,进而介导细胞厄洛替尼抵抗的发生.