小干扰核糖核酸沉默星形胶质上调基因对人转移胰腺癌细胞侵袭转移的影响
The Chinese Journal of Clinical Pharmacology(2019)
Abstract
目的 研究小干扰核糖核酸(siRNA)星形胶质细胞上调基因(AEG-1)对人胰腺癌细胞侵袭转移的影响及其分子机制.方法 将胰腺癌AsPC-1细胞随机分为3组:未转染组、脂质体转染组(以20 pmol·μL-1脂质体5μL转染)和AEG-1siRNA转染组(以20 pmol·μL-1 siRNA 5μL转染).用实时荧光定量-聚合酶链反应测定AEG-1 mRNA的表达水平;通过Transwell小室侵袭实验和软琼脂克隆形成实验观察沉默AEG-1对宫颈癌细胞侵袭及体外成瘤能力的影响,以免疫印迹法检测转移相关因子基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达水平.结果 未转染组、脂质体转染组和AEG-1siRNA转染组的胰腺癌细胞AEG-1基因表达量分别为0.92±0.18,0.95±0.22和0.18±0.10;上述这3组的MMP-9蛋白水平(灰度值)分别为0.89±0.05,0.98±0.04和0.35±0.02;上述这3组的MMP-2蛋白水平(灰度值)分别为0.88±0.04,0.81±0.03和0.36±0.02;上述这3组的细胞克隆形成数分别为64.33±3.05,68.23±4.51和16.63±2.21.AEG-1siRNA转染组与未转染组和脂质体转染组比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 RNA干扰AEG-1基因表达后,可显著抑制人胰腺癌AsPC-1细胞的侵袭转移能力,其作用机制可能通过下调MMP-9和MMP-2有关.
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