微小RNA-126联合薯蓣总皂苷对缺血再灌注模型神经干细胞-血管内皮细胞血管形成的作用机制研究

目的 探讨miR-126联合薯蓣总皂苷(TD)诱导缺血再灌注(I/R)模型神经干细胞(NSCs)-血管内皮细胞血管形成的调控机制.方法 提取新生SD小鼠的NSCs和脑微血管内皮细胞(BMECs).体外复制NSCs-BMECs共培养的I/R模型.将NSCs-BMECs共培养体系分为5组:对照组(正常培养组)和模型组(进行I/R诱导)、TD组(TD处理+I/R诱导)、mimic-NC+TD组(BMECs转染mimic-NC质粒+TD处理+I/R诱导)、miR-126 mimic+ TD组(BMECs转染miR-126 mimic质粒+TD处理+I/R诱导),TD剂量均为8 μg·mL-1,16 h后收集BMECs.基质胶用于检测血管形成能力,实时定量-聚合酶链反应用于检测miR-126表达,免疫印迹法检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3 K)、丝苏氨酸蛋白激酶(AKT)和磷酸化AKT(p-AKT)的蛋白表达.结果 对照组、模型组、TD组、mimic-NC+ TD组和miR-126 mimic+TD组的管腔长度分别为(4.42±0.67),(1.51 ±0.58),(2.74±0.84),(2.81±0.89)和(6.38±1.15)mm·mm-2;模型组与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05),说明I/R损伤抑制BEMCs血管新生;miR-126 mimic+TD组与mimic-NC+TD组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).TD组、mimic-NC+ TD组、和miR-126 mimic+ TD组p-PI3K/PI3K的蛋白表达水平(OD比值)分别为0.66±0.03,0.62±0.03和1.33±0.08;这3组p-AKT/AKT的蛋白表达水平(OD比值)分别为0.71 ±0.03,0.76±0.03和1.55±0.06,miR-126 mimic+TD组与mimic-NC+ TD组相比,差异有统计学意义(均P＜0.05).结论 miR-126联合TD能显著促进I/R诱导后NSCs-BMECs系统血管新生,其作用机制可能与miR-126激活PI3 K/AKT信号通路有关.