白藜芦醇调控细胞自噬对大鼠心肌缺血再灌注无回流的改善作用研究

目的 研究白藜芦醇对大鼠心肌缺血再灌注的保护作用及其机制.方法 按照随机数表法将大鼠分为3组:假手术组、模型组和实验组,每组12只.造模前,实验组灌胃给予白藜芦醇50 mg·kg-1·d-1,模型组和假手术组灌胃给予等体积的0.9％NaCl,1次/天,连续7 d.建立心肌缺血再灌注无回流大鼠模型.记录心电图,测量左心室内压最大上升速率(+dp/dtmax)和最大下降速率(-dp/dtmin);TTC染色法观察无回流区(ANR)和缺血区(AI)情况.用试剂盒法检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、C反应蛋白(CRP)、心肌钙蛋白I(cTnI)水平及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物(MPO)活性.以免疫印迹法检测LC3-II和Becl-1自噬相关蛋白水平;电镜下观察大鼠心肌细胞超微结构改变和自噬体.结果 干预后,实验组的T波和ST波显著降低(P<0.05),+dp/dtmax和-dp/dtmin显著下降(P<0.05);实验组和模型组的ANR/AI分别为(11.78±2.10)％,(21.52±4.07)％,组间比较差异有统计学意义(P<0.05).实验组和模型组的CK-MB分别为(503.35±200.23),(725.39±159.79)U·L-1;这2组的LDH分别为(1290.41±270.71),(2115.68±879.51)U·L-1;这2组的CRP分别为(38.85±3.12),(17.86±3.57)μmol·g-1;这2组的cTnI蛋白水平分别为(6.68±0.78),(8.05±0.76)U·L-1;这2组的MDA活性分别为(2.35±0.32),(5.17±0.37)U·mL-1;这2组的SOD活性分别为(1.68±0.25),(2.25±0.43)U·L-1;这2组的MPO活性分别为(1.57±0.27),(2.85±0.54)μmol·g-1,2组间比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P<0.05).实验组LC3-II和Beclin 1蛋白表达水平显著升高;电镜观察发现,实验组心肌细胞自噬体数量显著少于模型组.结论 白藜芦醇通过抑制心肌缺血再灌注期间自噬,减少心肌损伤.