鸦胆子苦醇联合长波紫外线辐射对人恶性黑色素瘤A375细胞凋亡的影响研究

目的 观察鸦胆子苦醇联合长波紫外线(UVA)辐射对人恶性黑色素瘤A375细胞凋亡的影响及机制.方法 人恶性黑色素瘤A375细胞分为空白组、对照组和实验组.空白组细胞不做任何处理,对照组用75 kJ·m-2长波紫外线处理,实验组在75 kJ· m-2长波紫外线处理2h后分别加入10,20,50,100,200nmol·L-1的鸦胆子苦醇.检测各组细胞活性、细胞周期及凋亡率,检测人转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)通路及线粒体凋亡途径相关蛋白表达情况.结果 对照组和实验组细胞活性均显著低于空白组,50,100,200 nmol·L-1实验组细胞活性均显著低于对照组,且随鸦胆子苦醇作用浓度增大而逐渐降低(P＜0.05或P＜0.01).对照组和10,20,50,100,200 nmol·L-1实验组细胞凋亡率分别为(3.21±0.24)％,(3.45±0.26)％,(5.86±0.42)％,(12.62±1.12)％,(13.02 ±2.24)％,(16.15±2.78)％,均显著高于空白组的(0.89±0.12)％,20,50,100,200 nmol·L-1实验组细胞凋亡率均明显高于对照组(均P＜0.01).对照组和实验组与空白组比较,人恶性黑色素瘤A375细胞G0/G1期细胞比例逐渐升高,G2/M和S期细胞比例逐渐降低(P＜0.05或P＜0.01).空白组、对照组和50 nmol·L-1实验组Nrf2蛋白相对表达量分别为1.69±0.23,1.23±0.24,1.03 ±0.15,谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)蛋白相对表达量分别为2.43±0.16,2.89±0.18,2.78±0.21,B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)蛋白相对表达量分别为0.59±0.14,1.05±0.21,1.59±0.24,胱天蛋白酶-3(caspase-3)蛋白相对表达量分别为2.63±0.15,2.71±0.26,2.63±0.28.与空白组比较,对照组和实验组人恶性黑色素瘤A375细胞Nrf2蛋白表达相对量降低,Bax和GSTP1蛋白表达相对量升高,caspase-3无明显变化.结论 鸦胆子苦醇联合UVA辐射可抑制人恶性黑色素瘤A375细胞增殖,且存在一定的量效关系,与抑制Nrt2信号通路及激活线粒体凋亡途径相关蛋白,加速细胞凋亡有关.