双嵌合抗原受体T细胞靶向治疗恶性胶质瘤的实验研究

目的 研究双嵌合抗原受体T细胞(BiCAR-T)对人脑胶质瘤细胞系U87的体外细胞毒活性,及其对BALB/c nude裸小鼠恶性胶质瘤模型的体内抗肿瘤作用.方法 用BALB/c Nude裸小鼠U87细胞皮下肿瘤模型和颅内肿瘤模型观察BiCAR-T细胞体内抑瘤作用.皮下肿瘤模型实验分为对照组、模型组和实验组,观察各组小鼠的肿瘤体积生长情况,取肿瘤组织进行病理学检测.颅内肿瘤模型实验分为对照组、模型组和实验组,取肿瘤组织进行病理学检测,用免疫组织化学法检测Cyclin D1的表达情况.结果 流式细胞术检测结果表明,BiCAR-T细胞CAR的表达率超过50％.体外实验中,效靶比为5∶1,10∶1,20∶1时:实验组细胞对U87细胞的杀伤率为(21.21±1.11)％,(42.45±2.52)％,(62.34±4.17)％,对照组细胞对U87细胞的杀伤率为(14.15±0.88)％,(22.31±1.21)％,(35.98±2.45)％;实验组IFN-γ水平为(403.36±25.98),(1756.29±103.36),(2784.52±190.13) pg·mL-1,对照组IFN-γ水平为(369.76±22.56),(1005.56±44.65),(1954.44±112.04) pg·mL-1,在效靶比为10∶1和20∶1时,2组间差异有统计学意义(P＜0.05).BiCAR-T细胞对BALB/c nude裸小鼠皮下恶性胶质瘤生长抑制率为45.80％,与模型组的100.00％比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).皮下肿瘤模型实验组与模型组相比,可见肿瘤细胞显著减少.颅内肿瘤模型实验组与模型组相比,肿瘤细胞显著减少,Cyclin D1表达下降.结论 BiCAR-T细胞是一种经基因工程修饰的高效靶向的免疫细胞,具有较强的体内外抑制恶性胶质瘤生长的作用.