HPLC-MS/MS法测定人血浆中华法林对映异构体浓度及应用

目的 建立HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中R-华法林和S-华法林浓度.方法 以乙酸乙酯为萃取剂,布洛芬为内标.分析柱:Lux cellulose-4柱(4.6 mm ×250 mm,5 μm);流动相:5 mmol醋酸铵水溶液(含0.4％甲酸)-乙腈=45∶55,流速:0.5 mL· min-1;质谱条件:电喷雾离子源,负离子模式,R-华法林、S-华法林和内标(IS)的离子通道分别为m/z 307.0→m/z 161.0、m/z 306.9→m/z106.9和m/z 204.8→m/z 161.0,考察该方法的专属性、标准曲线和定量下限、精密度和准确度、基质效应、提取回收率和稳定性.结果 R-华法林标准曲线方程为y =2.57×10-3X +3.84×10-3(R2=0.9976),在10.00～500.0 μg·L-1内线性关系良好,最低定量下限为10.00 μg·L-1.S-华法林标准曲线方程为y=2.46×10-3X +4.60×10-3(R2=0.996 8),在10.00～500.0 μg·L-1内线性关系良好,最低定量下限为10.00 μg ·L-1.回收率、精密度、准确度、基质效应和样本稳定性符合要求.结论 本文建立的方法灵敏可靠,可用于测定人血浆中华法林对映异构体浓度.