心安颗粒对病毒性心肌炎小鼠心肌核因子-κB信号通路及细胞凋亡的影响

目的 研究心安颗粒对病毒性心肌炎小鼠心肌的保护作用及可能机制.方法 小鼠腹腔注射含1×103病毒50％组织感染剂量(TCID50)柯萨奇病毒B3(CVB3)悬液0.2 mL,建立病毒性心肌炎(VMC)小鼠模型;正常组腹腔注射等体积培养液.按随机数字表法将BALB/c小鼠随机分为6组:正常组、模型组、对照组(利巴韦林片:0.2 mg·g-1),低中高3个剂量实验组(心安颗粒:10,20,40g·kg-1),每组20只.模型组及各给药组小鼠在腹腔注射病毒悬液2h后,每天灌胃1次;正常组和模型组灌胃等量0.9％ NaCl,连续7d.第8天,摘眼球取血后处死小鼠.以酶联免疫吸附法检测各组小鼠血清肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)浓度;以免疫组化法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及分化群68(CD68)巨噬细胞(CD68 macrophage)表达;以免疫印迹法检测心肌核因子-κB(NF-κB) p65表达.结果 与正常组比较,模型组血清cTnⅠ浓度为(453.60±33.85)pg·mL-1,心肌TNF-α、IL-6平均光密度值分别为5.25±2.16,4.66±1.28,CD68巨噬细胞数目为(13.83±1.94) count·mm-2,差异均有统计学意义(均P＜0.01).与模型组比较,对照组、中高2个剂量实验组血清cTnⅠ浓度分别为(86.70±14.51),(126.67±7.34),(104.56±11.96)pg·mL-1,这3组的心肌TNF-α表达水平分别为2.20±0.76,3.03±0.59,2.78±0.64,这3组的IL-6表达水平分别为2.48±0.52,3.39±0.61,1.85±0.84,这3组的CD68巨噬细胞浸润数分别为(4.69±0.53),(7.90±1.95),(6.49±1.44) count·mm-2,差异均有统计学意义(均P ＜0.05).模型组小鼠心肌中NF-κB p65条带灰度值为0.97-±0.07,与正常组比较差异有统计学意义(P＜0.01).与模型组的NF-κB p65灰度值为0.97±0.07比较,对照组、中高2个剂量实验组NF-κB p65灰度值分别为0.24±0.02,0.51±0.04,0.30±0.07,差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论 心安颗粒可明显缓解VMC小鼠心肌炎症反应和心肌损害,对心肌产生保护作用,其作用机制可能与抑制NF-κB信号通路的激活及心肌细胞凋亡有关.