哌拉西林他唑巴坦对多重耐药铜绿假单胞菌外排泵表达的影响

目的 研究哌拉西林他唑巴坦对多重耐药铜绿假单胞菌(MDRP)的MexAB-OprM、MexXY-OprM外排泵表达的影响.方法 选择2013-2015年临床分离的28株MDRP,用泵抑制剂——碳酰氰基-对-氯苯腙(CCCP) 100μmol·L-1干预后,测定各种常见抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)值,筛选出主动外排表型阳性菌株;用实时定量RT-PCR法测定并筛选出的主动外排表型阳性菌株的mexA、mexX表达水平,用1μg·mL-1哌拉西林他唑巴坦干扰12 h,再次测定mexA、mexX表达水平.结果 用CCCP干预后,共有10株MDRP对美罗培南、头孢他啶、环丙沙星以及左氧氟沙星的敏感性有显著变化,MDRP05对美罗培南、头孢他啶、环丙沙星、左氧氟沙星的MIC值为16,256,32,64 μg·mL-1,MDRP05对美罗培南+CCCP、头孢他啶+CCCP、环丙沙星+CCCP、左氧氟沙星+CCCP的MIC值降为4,64,2,4μg·mL-1.在10株主动外排泵表型阳性菌中,有9株(除MDRP07外)MDRP表现为mexA高表达,其中MDRP08、MDRP12、MDRP18、MDRP20表现为mexX高表达.用哌拉西林他唑巴坦干预后,除MDRP07、MDRP24外,其余各菌株mexA相对表达量均较干预前显著降低(P＜0.05).干预前,PAO1、MDRP05、MDRP07、MDPR08、MDRP09、MDPR12、MDPR15、MDRP18、MDRP20、MDRP24、MDRP25菌株的mexA表达水平分别为9544±336,18473±821,6405±197,22395±796,15062±416,19582±356,11294±764,10291±876,34950±1186,9874±327,11215±1183;干预后,这11株MDRP的mexA表达水平分别为7856±216,14963±613,6205±108,17485±733,13052±215,15063±453,9320±521,8940±728,30049±638,8920±426,9201±730.用哌拉西林他唑巴坦干预后,MDRP08、MDPR12、MDRP18以及MDRP20的mexX相对表达量较干预前差异有统计学意义(P＜0.05);而其余菌株干预前后mexX相对表达量变化差异无统计学意义(P＞0.05).干预前,这11株MDRP的mexX表达水平分别为73±6,35±3,27±4,186±21,17±3,387±37,65±12,734±70,395±24,25±5,36±6;干预后,这11株MDRP的mexX表达水平分别为70±10,37±2,28±5,148±15,17±5,312±46,60±11,658±30,332±41,28±8,28±8.结论 哌拉西林他唑巴坦能够影响外排泵系统MexAB-OprM、MexXY-OprM,这可能是哌拉西林他唑巴坦对多重耐药铜绿假单胞菌的作用机制之一.