益艾康胶囊对IFN-γ损伤肠黏膜屏障的紧密连接及相关蛋白Claudin-1、Claudin-5表达的影响

目的:通过研究益艾康胶囊对IFN-γ损伤肠黏膜屏障模型的紧密连接结构及紧密连接蛋白Claudin-1、Claudin-5表达的影响,揭示益艾康胶囊对HIV/AIDS肠黏膜屏障损伤的保护作用机制.方法:利用人结肠癌细胞株Caco-2联合Transwell技术构建肠黏膜屏障模型,IFN-γ刺激肠黏膜屏障模型模拟体内HIV损伤肠黏膜的病理过程.本实验设置空白对照组(空白鼠血清)、模型组(IFN-组)、益艾康胶囊组(IFN-γ+益艾康胶囊含药血清)、姜黄素组(IFN-γ+姜黄素),检测24 h、48h、72 h跨细胞膜电阻抗值、荧光素钠透过率、紧密连接蛋白Claudin-1、Claudin-SmRNA及蛋白的变化情况.结果:与空白对照组相比,模型组的跨膜电阻值,降低明显(P＜0.05),随干预时间呈下降趋势.与模型组相比,益艾康胶囊组在不同时间点均能提高Caco-2细胞单层电阻值,且数值高于同等条件下的姜黄素组;在模型组中,荧光素钠的渗漏量随干预时间增加而增加,48 h后明显降低.与模型组相比,益艾康胶囊组与姜黄素组荧光素钠的渗漏量均明显降低(P＜0.05),但2组之间不存在统计学差异;与空白对照组相比,IFN-γ诱导Caco-2细胞单层Claudin-1、Claudin-5mRNA及蛋白表达下降(P＜0.05),与模型组相比益艾康胶囊组Claudin-1、Claudin-5 mRNA及蛋白的表达上调(P＜0.05).结论:益艾康胶囊能降低IFN-γ引起的肠黏膜屏障的通透性,维持肠黏膜屏障的完整性,其机制与抑制紧密连接蛋白Claudin-1、Claudin-5的表达下降从而维持正常的紧密连接相关.