三叶青藤叶配方颗粒的质量标准研究及其5种有效成分的含量测定

目的:建立三叶青藤叶配方颗粒的质量标准,并同时测定其中5种有效成分的含量.方法:采用薄层色谱法(TLC)对三叶青藤叶配方颗粒中绿原酸、异荭草苷、异荭草苷-2′-O-鼠李糖苷进行定性鉴别.采用紫外分光光度法测定3批样品中总黄酮(以异荭草苷计)含量,并对其粒度、水分、溶化性及装量差异进行检查.以异荭草苷为内参物计算其余成分的相对校正因子,采用一测多评法测定样品中新绿原酸、绿原酸、荭草苷、异荭草苷、异荭草苷-2′-O-鼠李糖苷的含量,并与外标法测定结果进行比较.结果:绿原酸、异荭草苷、异荭草苷-2′-O-鼠李糖苷TLC图斑点清晰,分离度好,阴性对照无干扰.样品中异荭草苷检测质量浓度的线性范围为7.73～61.82μg/mL(r=0.9999);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2％;加样回收率为93.75％～97.85％(RSD=1.41％,n=6).3批样品不能通过一号筛且能通过五号筛的平均百分率分别为1.51％、1.55％、1.29％(n=3),含水量分别为4.63％、5.18％、4.03％(n=3);颗粒均在5 min内溶化;装量差异为4.8％～5.0％,均符合2015年版《中国药典》(四部)颗粒剂的相关规定.一测多评法测定5种成分质量浓度的线性范围分别为2.325～93μg/mL(r=0.9999)、5.125～205μg/mL(r=0.9999)、1.150～46μg/mL(r=0.9993)、2.625～105μg/mL(r=0.9999)、4.725～189μg/mL(r=0.9999);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3％;加样回收率分别为99.78％～106.13％(RSD=2.33％,n=6)、95.07％～103.32％(RSD=2.72％,n=6)、97.17％～105.43％(RSD=2.98％,n=6)、95.52％～101.33％(RSD=2.46％,n=6)、99.42％～105.56％(RSD=2.34％,n=6).异荭草苷相对于新绿原酸、绿原酸、荭草苷、异荭草苷-2′-O-鼠李糖苷的相对校正因子分别为0.731、0.805、0.821、0.590;一测多评法测得5种成分的含量分别为0.828～1.123、2.379～3.118、0.281～0.880、1.039～1.393、2.121～3.209 mg/g,外标法测得的含量分别为0.803～1.099、2.345～3.085、0.269～0.872、1.039～1.393、2.113～3.201 mg/g;两种方法测定结果比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论:所建质量标准简便、快速,可用于三叶青藤叶配方颗粒的质量控制;所建一测多评法准确、高效,可用于同时测定三叶青藤叶配方颗粒中5种有效成分的含量.