金银花多糖的指纹图谱及体外抗病毒活性研究

目的:建立金银花多糖的指纹图谱,并考察其对呼吸道合胞病毒(RSV)的体外抑制作用.方法:通过水提、二次醇沉制备金银花多糖;所得多糖经三氟乙酸水解和盐酸羟胺、吡啶等衍生化后,采用气相色谱法(GC)建立指纹图谱.色谱柱为HP-5毛细管色谱柱,检测器为火焰离子化检测器,进样口温度为250℃,检测器温度为300℃,程序升温,载气为氮气(流速50 mL/min),分流进样(分流比60:1),进样量为2.0μL.以鼠李糖为参照,绘制12批金银花药材样品(S1～S12)的GC指纹图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》进行相似度评价并确定共有峰;采用SPSS 21.0软件进行聚类分析和主成分分析.以利巴韦林为阳性对照,以半数有效浓度(EC50)、治疗指数(TI)为指标,采用MTT法考察金银花多糖对RSV的体外抑制作用.结果:12批金银花药材样品的GC指纹图谱有12个共有峰,相似度≥0.994;共指认鼠李糖、阿拉伯糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、肌醇六乙酸酯等7个共有峰.12批药材样品共聚为两类,即S1、S7、S10、S11聚为一类,其余聚为一类;主成分分析中,3个主成分的特征值均大于1(分别为5.659、2.745、1.724),其累积贡献率为84.400％.样品综合得分以S12最高,S5次之,S11最低.金银花(S12)总多糖、80％醇沉多糖、50％醇沉多糖、20％醇沉多糖的EC50值分别为0.76、0.61、1.03、3.04 g/L,TI值分别为15.36、18.51、11.69、4.22;其中,80％醇沉多糖的EC50值最低,TI值与阳性对照(20.08)接近.结论:所建指纹图谱可为金银花药材的质量评价提供参考.金银花多糖对RSV具有一定的体外抑制活性,且以80％醇沉多糖活性最强.