救必应酸的单体制备及RP-HPLC法测定救必应药材及精制品中3种活性成分的含量

目的:制备高纯度的救必应酸并测定救必应药材及精制品中3种活性成分紫丁香苷、长梗冬青苷、救必应酸的含量.方法:采用醇提法制备救必应皂苷,以甲醇和氢氧化钠进一步水解,并经重结晶后得到救必应酸单体.采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定救必应药材及精制品1和精制品2中紫丁香苷、长梗冬青苷、救必应酸的含量.色谱柱为Agilent XDB C18,流动相为水-乙腈(梯度洗脱),柱温为30 ℃,流速为1. 2 mL/min,检测波长为210 nm,进样量为10 μL.结果:所制救必应酸纯度达99％以上.紫丁香苷、长梗冬青苷、救必应酸进样量分别在0. 18~3. 22、0. 59~10. 36、0. 20~3. 53 μg范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系(r均为0. 9999),精密度、稳定性(24 h)、重复性试验的RSD均小于2. 0％ (n=6~7),平均加样回收率为96. 08％~100. 81％ (RSD≤1. 98％,n=6).紫丁香苷、长梗冬青苷、救必应酸的含量在救必应药材中分别为1. 61％、7. 26％、1. 29％ (RSD≤1. 08％, n=3), 在精制品1中分别为0、82. 59％、4. 18％ (RSD≤1. 67％, n=3);在精制品2中分别为0、73. 29％、7. 41％ (RSD≤1. 15％, n=3).结论:所制救必应酸纯度高、制备方法简单且安全环保.建立的RP-HPLC法简单、可靠,可满足快速测定救必应药材及其精制品含量的要求.