改进HPLC法测定门冬氨酸鸟氨酸原料药中的有关物质

目的:改进测定门冬氨酸鸟氨酸原料药中有关物质的方法.方法:采用高效液相色谱法.色谱柱为Phenomenex Luna NH2(两根串联),流动相为0.02 mol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH 5.6)-乙腈(40:60,V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为205 nm,柱温为35℃,进样量为20μL.结果:马来酸、3-氨基-2-哌啶酮、琥珀酸、苹果酸、富马酸、β-门冬氨酰门冬氨酸检测质量浓度线性范围分别为5.398～26.992μg/mL(r=0.9991)、5.204～26.021μg/mL(r=0.9993)、5.149～25.749μg/mL(r=0.9996)、5.174～25.874μg/mL(r=0.9993)、5.164～25.823μg/mL(r=0.9993)、5.194～25.973μg/mL(r=0.9995);定量限分别为0.22、0.53、51.50、103.50、0.26、8.31 ng,检出限分别为0.13、0.26、10.30、20.70、0.13、2.08 ng;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均不超过2％;加样回收率分别为99.30％～102.31％(RSD=1.02％,n=9)、99.88％～100.89％(RSD=0.37％,n=9)、99.36％～101.53％(RSD=0.70％,n=9)、99.13％～102.65％(RSD=1.15％,n=9)、100.18％～101.45％(RSD=0.38％,n=9)、99.39％～100.81％(RSD=0.58％,n=9).6批样品均未检出马来酸、琥珀酸和β-门冬氨酰门冬氨酸;3-氨基-2-哌啶酮含量为0.006％～0.056％,苹果酸含量为0.014％～0.071％,富马酸含量为0.0005％～0.0034％,最大未知杂质含量为0.013％～0.110％,未知杂质总含量为0.013％～0.120％.结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性均较好,可用于门冬氨酸鸟氨酸原料药中有关物质的测定.