下调AFAP-1L2表达对人胰腺癌细胞吉西他滨化疗敏感性的影响

目的 观察下调AFAP-1L2表达对胰腺癌细胞吉西他滨(Gem)化疗敏感性的影响及对胰腺癌细胞的杀灭作用.方法 构建靶向siAFAP-1L2干扰质粒下调AFA-1L2表达,转染MIAPACA-2细胞,以Western blot法及(qRT)-PCR法检测转染效率;MTT检测AFAP-1L2下调后细胞存活率.对siAFAP-1L2转染MiaPaCa-2细胞给予吉西他滨干预,采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡.结果 与siNegative control组比较,给予不同浓度梯度siAFAP-1L2转染MIAPACA-2细胞,siAFAP-1L2组细胞存活率较低(P＜0.05);MiaPaCa-2细胞在培养24、48、72、96 h后,转染siAFAP-1L2组细胞在48 h后存活率较低(P＜0.05);siAFAP-1L2转染后细胞存活率与siAFAP-1L2转染浓度和时间具有相关性(r=-0.921,r=-0.907).将化疗药Gem 20 nmol/L加入分别以不同浓度梯度siAFAP-1L2转染的胰腺癌细胞48 h后,与siNegative control组比较,siAFAP-1L2组细胞存活率较低(P＜0.05);将化疗药Gem 20 nmol/L加入siAFAP-1L2 100 nmol/L转染的Mia-PaCa-2细胞,培养24、48、72、96 h后,与siNegative control组比较,siAFAP-1L2组细胞在72、96 h后存活率较低(P ＜0.05);siAFAP-1L2转染后,Gem化疗细胞存活率与siAFAP-1 L2转染浓度和时间具有相关性(r=-0.967,r=-0.984).siAFAP-1L2+ Gem组与siAFAP-1 L2组凋亡率分别为37.28％、11.65％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 下调AFAP-1L2表达可增强胰腺癌细胞对吉西他滨化疗的敏感性,促进对胰腺癌细胞的杀伤作用,可作为胰腺癌治疗的靶向候选基因.