华蟾素增强氟尿嘧啶对食管癌TE-1细胞杀伤作用及机制研究

目的 观察华蟾素对氟尿嘧啶处理后的食管癌TE-1细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 Western印迹检测不同浓度华蟾素干预后Bcl-2/Bax信号通路蛋白水平,MTT检测不同浓度及不同细胞培养时间华蟾素对氟尿嘧啶处理后TE-1细胞增殖的影响.流式细胞术检测华蟾素对氟尿嘧啶处理后TE-1细胞周期及凋亡的影响.结果 随着Cinobufotalin浓度升高,Bcl-2、Survivin蛋白表达水平呈剂量依赖性下降,Cleaved PARP、Bax蛋白表达呈剂量依赖性上升;Cinobufotalin组TE-1细胞凋亡率高于Negative组(t=2.236,P＜0.05),Cinobufotalin+ 5-FU组TE-1细胞凋亡率高于Negative Control组、Cinobufotalin组及5-FU组(P＜0.05);与Negative Control组对比,培养48 h后,Cinobufotalin组TE-1细胞的细胞周期停留在G1、G2期的比例减少,S期比例升高(P＜0.05);与Negative Control组、Cinobufotalin组及5-FU组比较,培养48 h后,Cinobufotalin+ 5-FU组TE-1细胞周期停留在G1、G2期的比例减少,S期比例升高(P＜0.05);MTT显示,Cinobufotalin干预后,TE-1细胞存活率呈现时间依赖性下降趋势,Cinobufotalin组TE-1细胞培养48、72、96 h后的存活率低于Negative Control组(P＜0.05);Cinobufotalin+ 5-FU组TE-1细胞培养48、72、96 h后存活率低于Negative Control组、Cinobufotalin组及5-FU组(P＜0.05);不同浓度梯度的华蟾素作用48 h后,Cinobufotalin组、Cinobufotalin+5-FU组TE-1细胞存活率呈现剂量依赖性下降.结论 华蟾素通过Bcl-2/Bax通路降低食管癌细胞存活率,促进其凋亡,其对氟尿嘧啶活性具有增效作用.