模拟微重力下瘦素对肺T淋巴细胞蛋白激酶C信号转导途径的影响
Chinese Remedies & Clinics(2014)
摘要
目的:探讨在模拟微重力下瘦素对肺T淋巴细胞蛋白激酶C(PKC)信号转导途径的影响。方法分离肺T淋巴细胞,利用旋转式细胞组织培养系统(RCCS)模拟微重力条件。培养T淋巴细胞后,采用PepTag非放射性PKC检测试剂盒测定T淋巴细胞PKC活性;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定T淋巴细胞的白细胞介素-2(IL-2)生成;采用流式细胞技术检测T淋巴细胞表面抗原CD25、CD71的表达。结果在普通细胞培养容器组,刀豆蛋白A(ConA)组与瘦素组、ConA+瘦素组与ConA组相比,PKC活性增强,IL-2生成增加,表面表达CD25分子的细胞增多;模拟微重力条件下,与普通细胞培养容器培养的T淋巴细胞相比较,ConA刺激后,PKC活性、IL-2水平,表面表达CD25分子的细胞减少(P<0.01);在模拟微重力条件下,瘦素组与ConA组相比,相同指标无明显变化,而且加入瘦素的ConA组与ConA组比较,仍无明显变化。RCSS组中的ConA+瘦素组,与普通细胞培养容器组中的ConA+瘦素组相比较,上述指标均降低,差异有统计学意义(P<0.01);且在模拟微重力条件下,瘦素组和ConA+瘦素组与同样条件下的ConA+12-肉豆蔻酰-13-乙酸佛波酯(PMA)组相比,上述所有指标均降低(P<0.01)。结论模拟微重力条件下,T淋巴细胞的激活受到抑制;PKC的活性降低,表面表达CD25的细胞数降低,T淋巴细胞分泌的IL-2降低;同样条件下,PMA对T淋巴细胞的上述指标有部分恢复作用。
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关键词
Weightlessness simulation,Leptin,Lymphocytes,Protein kinase C,Rotary cell culture system
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