胡椒碱诱导人胰腺癌PANC-1细胞凋亡的Caspase 3/Bax/Bcl-2信号通路机制研究

目的 观察胡椒碱对人胰腺癌PANC-1细胞增殖、凋亡的影响,探讨其诱导凋亡的Caspase 3/Bax/Bcl-2信号通路机制.方法 将人胰腺癌PANC-1细胞分为阴性对照组和40,20,10 μmol·L-1胡椒碱组,采用MTT、台盼蓝染色计数及平板克隆形成试验法检测胡椒碱对PANC-1细胞增殖、生长曲线及克隆形成的影响;采用Hoechst 33258染色法观察胡椒碱对PANC-1细胞凋亡形态学的影响;采用RT-PCR和Western blotting法检测胡椒碱对PANC-1细胞Caspase 3、cleaved-Caspase 3、Bax及Bcl-2 mRNA及蛋白表达的影响.结果 MTT、台盼蓝染色计数和平板克隆形成实验结果显示40,20 μmol·L-1胡椒碱可明显抑制PANC-1增殖、细胞生长曲线和克隆形成;Hoechst 33258染色实验显示40,20,10 μmol·L-1胡椒碱有诱导PANC-1细胞凋亡作用;RT-PCR和Western blotting实验结果显示40,20 μmol·L-1胡椒碱可上调PANC-1细胞Caspase 3、Bax mRNA表达水平,上调cleaved-Caspase 3和Bax蛋白表达水平,下调Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平.结论 胡椒碱可抑制人胰腺癌PANC-1细胞生长、增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与调控Caspase3/Bax/Bcl-2凋亡信号通路有关.