二妙散对巨噬细胞分化的调控作用研究

目的 研究二妙散对脂多糖 (lipopolysaccharide, LPS) 诱导巨噬细胞分化的影响.方法 噻唑蓝 (methylthiazolyl tetrazolium, MTT) 法测定二妙散水煎液对细胞活力的影响;将LPS (100ng·mL-1) 及不同浓度 (0.1, 1.0, 10mg·mL-1) 的二妙散水煎液共同作用RAW264.7细胞后, 酶联免疫吸附法 (enzyme-linked immune sorbent assay, ELISA) 检测上清液中肿瘤坏死因子-α (tumornecrosisfactor-α, TNF-α) 、白介素-10 (interleukin10, IL-10) 的含量, 实时荧光定量PCR (Real-time fluorescent quantitative PCR, qPCR) 检测RAW264.7细胞中白介素-1β (Interleukin 1β, IL-1β), IL-6的mRNA水平, Western blot检测RAW264.7细胞NOS2的蛋白表达情况.结果 二妙散水煎液在0.01～100mg·mL-1内对RAW264.7细胞无明显毒性.与LPS诱导的模型组相比, 二妙散水煎液能明显降低细胞上清液中TNF-α的含量 (P<0.05) 、升高IL-10的含量 (P<0.05), 且可显著抑制RAW264.7细胞中M1分化标记物IL-1β、IL-6的mRNA水平 (P<0.05) 及NOS2的蛋白表达 (P<0.05) .结论 二妙散可通过抑制巨噬细胞向M1促炎方向分化, 从而发挥抗炎作用.