实时荧光定量PCR法检测门冬氨酸鸟氨酸原料药中毕赤酵母菌DNA残留量

目的 建立可定量检测门冬氨酸鸟氨酸原料药中毕赤酵母菌DNA残留量的实时荧光定量PCR方法.方法 采用宿主细胞残留DNA样本前处理试剂盒 (磁珠法) 提取毕赤酵母菌DNA, 利用毕赤酵母残留DNA检测试剂盒 (PCR-荧光探针法) 进行扩增反应, 绘制标准曲线, 建立毕赤酵母菌DNA残留量的Real-time PCR检测方法, 并验证其准确性和精密性.结果 毕赤酵母菌DNA质量浓度在0.03～300 pg·μL-(16) 内线性良好 (r>0.99), 定量限为0.03 pg·μL-(16);应用该法对3批门冬氨酸鸟氨酸原料药进行测定, 毕赤酵母菌DNA残留量均远低于每剂10 ng.结论 该方法可用于门冬氨酸鸟氨酸原料药中毕赤酵母菌DNA残留量的定量测定.