小檗碱、巴马汀和药根碱在大鼠原代肝细胞中的摄取转运特征

目的 通过大鼠原代肝细胞模型,明确小檗碱、巴马汀和药根碱的肝细胞摄取特征.方法 Seglen两步法分离大鼠原代肝细胞并悬浮培养,应用已知底物瑞舒伐他汀评价转运体的功能,将药物在4和37℃分别与肝细胞孵育不同时间,UPLC-MS/MS测定肝细胞摄取量,考察温度和时间对药物摄取的影响,并计算转运参数.通过浓度依赖的摄取实验,计算得到Km、Vmax和主动摄取率等参数.在肝细胞模型上,将转运体的特异抑制剂与小檗碱、巴马汀和药根碱共孵育,观察阳性抑制剂对受试药物转运的影响.结果 小檗碱、巴马汀和药根碱在37℃条件下的摄取量随着底物浓度的增高而增加,4℃条件下摄取量较低且变化很小,3种生物碱进入肝细胞的CLactive/CLuptake分别为85.26％、74.90％和57.74％.阳性抑制剂布洛芬、地高辛、甘草酸和盐酸哌唑嗪能显著降低小檗碱和巴马汀的摄取,甘草酸和盐酸哌唑嗪能减少药根碱的摄取.结论 小檗碱、巴马汀和药根碱进入肝细胞均以主动转运为主,Oatp1 a1、Oatp1 a4、Oatp1 b2和Oct1可能介导了小檗碱和巴马汀的肝脏摄取,Oatp1 b2和Oct1参与了药根碱的主动转运.