细胞周期抑制因子p21活化巨噬细胞促进小鼠肺纤维化发生发展

探讨博来霉素(bleomycin,BLM)损伤所致小鼠肺纤维化发病过程中肺泡巨噬细胞的细胞周期抑制因子p21 (cell cycle inhibitor p21,p21)蛋白表达及其对巨噬细胞活化的调节作用.免疫荧光染色法检测肺纤维化组织中肺泡巨噬细胞中CD206的表达;RT-PCR (reverse transcription-polymerase chain reaction)法检测巨噬细胞活化标志蛋白的表达;巨噬细胞/成纤维细胞共培养法检测巨噬细胞对成纤维细胞活化及胶原收缩能力的影响;采用免疫荧光和免疫印迹法检测巨噬细胞中p21蛋白表达的变化;采用21敲低和过表达病毒感染肺泡巨噬细胞,RT-PCR和巨噬细胞/成纤维细胞共培养法检测改变p21表达对肺泡巨噬细胞促纤维化表型的调节作用.动物实验操作过程依照中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所实验动物管理与动物福利委员会的要求执行.结果 显示:与对照组比较,模型组肺泡巨噬细胞CD206的表达增加、巨噬细胞活化标志蛋白表达增加、模型组肺泡巨噬细胞促进成纤维细胞的活化并增强其胶原收缩能力.模型组小鼠肺泡巨噬细胞中p21蛋白表达增加.敲低p21可显著抑制巨噬细胞促纤维化表型,而过表达对照小鼠肺泡巨噬细胞中21则促进其促纤维化表型的转化.以上研究结果表明,肺纤维化小鼠肺泡巨噬细胞中p21表达增加,p21可通过促进巨噬细胞活化参与肺纤维化发病.