Yes激酶相关蛋白活化对急性肺损伤修复的影响及其机制

目的:探讨Yes激酶相关蛋白(YAP)活化对感染性急性肺损伤修复的影响及可能机制.方法:SPF级雄性ICR小鼠90只,随机分为2组,LPS组和LPS+XMU组.LPS组腹腔注射脂多糖(LPS)(7.5 mg/kg),LPS+XMU组在给予LPS的同时腹腔注射XMU-MP-1(YAP激动剂)(1 mg·kg-1·d-1,连续3 d).在给予LPS 0 h、24 h、48 h、72 h后,采用苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织形态.制备小鼠肺泡灌洗液,BCA法检测总蛋白含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测TNF-α和IL-6含量,比色法检测髓过氧化物酶(MPO)活性.Western blot法检测小鼠肺细胞核内YAP及胞浆磷酸化YAP(P-YAP)、肺组织YAP靶基因-结缔组织生长因子(CTGF)及增殖细胞核抗原(PC-NA)蛋白的表达.结果:与LPS组比较,LPS+XMU组核内YAP蛋白表达在24 h、48 h、72 h表达分别上调39.2％、148.1％ 和42.9％(P均<0.05),同时YAP下游靶蛋白CTGF蛋白表达分别上调186.6％、10.1％、146.1％(P均<0.05),而胞浆中P-YAP显著下调.与LPS组比较,LPS+XMU 24 h组肺泡灌洗液中IL-6和TNF-α含量分别降低28.4％和23.7％,48 h组肺泡灌洗液MPO活性和TNF-α 含量分别降低13.5％ 和39.5％,72 h组肺泡灌洗液IL-6和TNF-α含量分别降低42.8％和16.7％(P均<0.05).与LPS组比较,LPS+XMU 24 h组肺组织PCNA蛋白表达无统计学差异,而48 h、72 h PCNA表达分别上调44.2％、14.9％(P均<0.05).与LPS组比较,LPS+XMU 24 h组、48 h组和72 h组肺泡灌洗液蛋白含量分别降低32.4％、46.0％和26.3％(P均<0.05).HE染色结果显示,与LPS组比较,LPS+XMU组肺组织炎症细胞渗出减少,肺泡壁重构增加,肺组织修复明显加快.结论:YAP活化通过多种机制来改善肺损伤,促进肺损伤修复,损伤期抑制炎症,修复期促进炎症消减和诱导细胞增殖.