PolyNP试验及MPNP试验快速检测肺炎克雷伯菌多粘菌素类耐药表型的应用评估

目的:探讨快速多粘菌素NP试验(rapid polymyxin NP test,Poly NP test)对多粘菌素类耐药肺炎克雷伯菌的检测价值;进一步评估改良快速多粘菌素NP试验(modified rapid polymyxin Nordmann/Poirel test,MPNP)对产MCR肺炎克雷伯菌的检出价值.方法:本研究共纳入48株菌,包括14株多粘菌素类敏感肺炎克雷伯菌(poly-myxin sensitive Klebsiella pneumoniae,PolS-KP),29株多粘菌素类耐药细菌(26株为多粘菌素类耐药肺炎克雷伯菌(polymyxin resistant Klebsiella pneu-moniae,PolR-KP),3株为多粘菌素类天然耐药菌),以及5株非发酵菌.以微量肉汤稀释法的结果为标准,采用Poly NP试验检测多粘菌素类的药敏表型.PCR及测序确定肺炎克雷伯菌的多粘菌素类染色体介导的耐药基因pmrA/pmrB,phoP/phoQ,mgrB和质粒介导的耐药基因mcr-1～mcr-8,采用MPNP试验检测是否为产MCR阳性菌株.结果:29株多粘菌素类耐药菌,3株天然耐药细菌的Poly NP试验均为阳性;26株PolR-KP中,24株为Poly NP试验阳性,2株为阴性;14株PolS-KP均为阴性,且所有结果均在2 h内出现最终颜色变化.该方法判断肺炎克雷伯菌多粘菌素类耐药表型的敏感性和特异性为93.1％ 和100％.26株PolR-KP中,有4株为MCR阳性,其中3株产mcr-1,1株产mcr-8;22株为染色体介导的耐药,其中12株为双组分系统PmrAB突变,4株为双组分系统PhoPQ突变,6株为mgrB基因改变.4株MCR阳性菌株的MPNP试验表现为阴性结果,其余非MCR株的PolR-KP和PolS-KP,以及多粘菌素类天然耐药菌株的MPNP均表现为阴性结果.MPNP试验不能筛选出MCR阳性的肺炎克雷伯菌.结论:Poly NP试验快速,特异性强,敏感性高,可用于临床多粘菌素类耐药肺炎克雷伯菌的快速检测.MPNP试验对MCR阳性肺炎克雷伯菌检出不佳,仍需进一步探讨适用于肺炎克雷伯菌的MCR快速表型检测方法.