樟芝多糖抑制肿瘤相关成纤维细胞生成的作用研究

目的:研究樟芝多糖抑制肝癌细胞条件性培养基诱导骨髓间充质干细胞(MSC)向肿瘤相关成纤维细胞转化的作用.方法:分离人肝癌细胞HepG2培养基(CM),将骨髓间充质干细胞分为正常组、对照组和实验组,正常组为常规DMEM培养基+10％胎牛血清(FBS),对照组为CM+10％FBS培养,实验组为CM+10％FBS培养+10 mg/L的樟芝多糖培养.应用CCK-8试剂盒检测MSC的细胞活性,BrdU标记-流式细胞术检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率,PI染色检测细胞周期变化,Western blot法检测α-平滑肌激动蛋白(α-SMA)、肌间线蛋白(Desmin)、成纤维细胞活化蛋白(FAP)、凝血酶敏感蛋白1(Tsp-1)、成纤维细胞特异蛋白(FSP)的表达以及转化生长因子 β1(TGF-β1)、信号转导分子(Smad1、Smad2)的表达水平,免疫荧光染色法检测 α-SMA、FAP和FSP的表达水平.结果:对照组MSC的细胞活力显著高于正常组和实验组(P<0.05),三组细胞的细胞凋亡率无统计学差异(P>0.05),对照组MSC中G0/G1期比例降低,S期比例增高,相比正常组和实验组具有统计学差异(P<0.05),对照组MSC中α-SMA、Desmin、FAP、Tsp-1、FSP的表达水平以及TGF-β1、Smad1、Smad2的表达水平显著高于正常组和实验组(P<0.05),免疫荧光结果也显示对照组中α-SMA、FAP和FSP的水平显著高于正常组和实验组(P<0.05).结论:肝癌细胞条件性培养基可以促进MSC向肿瘤相关成纤维细胞转化,而樟芝多糖可以抑制该转化,这是樟芝多糖抗肿瘤作用的机制之一.