长链非编码RNA TSIX通过靶向miR-384调控人胰腺癌细胞增殖的研究

目的:观察长链非编码RNA(lncRNA)-TSIX在胰腺癌组织及细胞中的表达,并探讨其对细胞增殖的影响及可能的机制.方法:采用qPCR法检测TSIX在5种胰腺癌细胞株(BxPC-3、CAPAN-1、AsPC-1、CFPAC-1和SW1990)、人正常胰腺导管上皮细胞HPDE6-C7和7例胰腺癌组织及其癌旁组织中的差异性表达.生物信息学预测并分析与TSIX互补配对的miRNA及下游基因.用携带TSIX siRNA基因的重组慢病毒颗粒(LV-siRNA)感染SW1990细胞作为实验组,以阴性对照慢病毒颗粒(LV-NC)作为对照组.通过qPCR检测低表达TSIX对miR-384和Gab2 mRNA表达的影响,通过Western blot检测Gab2和PI3 K/AKT通路蛋白的表达,通过流式细胞术、MTT比色法、集落形成实验检测低表达TSIX对SW1990细胞周期、活力及增殖的影响.结果:与胰腺导管上皮细胞HPDE6-C7相比,TSIX在胰腺癌细胞株中均呈高表达(P＜0.01),其中在SW1990细胞中表达水平最高(P＜0.01).TSIX在胰腺癌组织中的表达水平高于其癌旁组织,差异有统计学意义(P＜0.05).SW1990细胞转染TSIX siRNA后,qPCR检测细胞中TSIX表达量明显降低(P＜0.01),miR-384表达升高(P＜0.01),Gab2的mRNA表达降低(P＜0.01);低表达TSIX能显著阻滞细胞周期、抑制细胞活力和集落形成能力(P＜0.01).结论:lncRNA TSIX在胰腺癌组织及细胞中高表达,低表达TSIX可抑制SW1990细胞的增殖,其机制可能为TSIX通过与miR-384互补配对调控Gab2基因的表达.