LC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中4种CYP450探针药物浓度

目的:建立高效液相-串联质谱(LC-MS/MS)法同时测定大鼠血浆中非那西丁(1A2),甲苯磺丁脲(2C9),右美沙芬(2D6),咪达唑仑(3A4)4种探针底物浓度.方法:采用symmetryC18柱(2.1 mm×50 mm,3.5 μm),流动相为甲醇:0.1％甲酸水溶液(67∶33,V/V),流速为0.2 mL/min,柱温35℃.电喷雾离子化,检测方式为多反应离子监测.以卡马西平为内标,同时检测大鼠血浆中非那西丁、甲苯磺丁脲、右美沙芬、咪达唑仑的药物浓度,并进行其专属性、精密度、准确度、稳定性的验证.结果:非那西丁(10～5000 ng/mL)、甲苯磺丁脲(20 ～ 10 000 ng/mL)、右美沙芬(4～1000 ng/mL)、咪达唑仑(4～1 000 ng/mL)线性关系良好,R2 ＞0.99,准确度为95.6％～105.2％,日内和日间精密度RSD(％)＜10％,提取回收率＞77％,RSD(％)＜7％、基质效应在90.7％ ～ 100.3％之间,RSD(％)＜5.9％,稳定性好.结论:建立了同时快速测定大鼠血浆中4种探针药物(非那西丁、甲苯磺丁脲、右美沙芬、咪达唑仑)浓度的高效液相-串联质谱分析方法,准确度和灵敏度高,专属性强.血浆样品的稳定性好,适用于CYP450酶活性的研究.