南赤瓟醇提物通过PI3K/Akt/mTOR信号通路促进人宫颈癌Caski细胞凋亡

目的:研究南赤瓟醇提物影响PI3 K/Akt/mTOR信号通路促进人宫颈癌Caski细胞凋亡的作用机制.方法:用南赤瓟醇提物(0.062 5、0.125、0.25、0.50、1.00、2.00 mg/mL)作用Caski细胞24 h后,检测其对细胞增殖的影响;然后用南赤瓟醇提物(0.25、0.50和1.00 mg/mL)作用Caski细胞24 h后,流式细胞术测定细胞周期DNA含量及亚G1凋亡峰,ELISA试剂盒检测Caski细胞中Caspase-9和Caspase-3活性及线粒体和胞浆中细胞色素C(Cyt C)含量,Real-timePCR测定P53、Bcl-2和Bax mRNA表达,并计算Bcl-2/Bax比值,Western blot测定PI3K、Akt、mTOR磷酸化水平(p-PI3K、p-Akt、p-mTOR),并计算p-PI3 K/PI3K、p-Akt/Akt和p-mTOR/mTOR比值.结果:南赤瓟醇提物对Caski细胞生长抑制作用呈明显的剂量依赖性;南赤瓟醇提物(0.25、0.50和1.00 mg/mL)能显著抑制Caski细胞增殖,并将其阻滞于G2/M期;可抑制p-PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋白表达水平,降低p-PI3 K/PI3 K、p-Akt/Akt和p-mTOR/mTOR比值;上调P53和Bax mRNA表达,下调Bcl-2 mRNA及Bcl-2与Bax比值;降低线粒体中Cyt C含量,升高胞浆中Cyt C含量;增强Caspase-9和Caspase-3活性(P＜0.05,P＜0.01).结论:南赤瓟醇提物诱导Caski细胞凋亡的作用机制与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路磷酸化有关.