梯度洗脱-HPLC法测定异烟肼及其片剂中有关物质

目的:建立梯度洗脱-HPLC法测定异烟肼原料及其片剂中有关物质,并对国内外20家企业异烟肼片的有关物质进行分析.方法:资生堂CAPCELL PAK ADME(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为0.05 mol· L-1磷酸二氢钾溶液(pH 6.0±0.05)-甲醇,梯度洗脱,流速为1.0 mL· min-1,检测波长为262 nm,柱温为35℃.已知杂质测定采用相对保留时间(RRT)定性,校正因子(f)定量的主成分自身对照法,未知杂质为不加校正因子的自身对照法.结果:异烟肼、6个已知杂质以及其他降解杂质分离度均大于1.5,异烟肼与6个已知杂质呈良好的线性关系,6个已知杂质的平均回收率为92.5％～110.0％,精密度、重复性、稳定性、专属性均良好.美国山德士片剂中检出1个含量达3.1％的特有杂质,LC-MS初步确定其为异烟肼与乳糖反应产生的乳糖异烟腙.国内大多数企业片剂单个杂质含量在0.5％以下,各杂质总和含量在1.0％以下.结论:梯度洗脱-HPLC方法灵敏,专属性好,可用于异烟肼及其片剂质量一致性评价中有关物质的分析研究.