HPLC-ELSD法测定附子水溶性生物碱提取物和蒸附片中5种生物碱的含量

目的:建立同时测定附子水溶性生物碱提取物和蒸附片中新乌头原碱、次乌头原碱、附子灵、尼奥灵、宋果灵含量的方法.方法:采用HPLC-ELSD法,Extend C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,流动相为乙腈(A)-0.1％三乙胺水溶液(B),梯度洗脱(0～8 min,10％A→20％A;8～15 min,20％A→25％A;15～25 min,25％A→25％A;25～30 min,25％A→28％A;30～31 min,28％A→60％A;31～42 min,60％A→65％A),流速1.0 mL·min-1,柱温35℃,蒸发光散射检测器(蒸发温度50℃,载气流速1.5 L· min-1,增益为1).结果:在此色谱条件下,5种生物碱分离度良好,新乌头原碱、次乌头原碱、附子灵、尼奥灵、宋果灵分别质量浓度在50.01～500.08、30.00～300.02、30.01～300.13、50.01～500.07、15.00～150.04 μg·mL-1范围内线性关系良好(r≥0.999 1);平均加样回收率(n=6)分别为98.2％(RSD=1.9％),98.3％(RSD=1.6％),98.5％(RSD=1.3％),97.2％(RSD=1.3％),97.7％(RSD=1.7％).结论:该方法简便、准确,可用于附子水溶性生物碱提取物与蒸附片的质量控制与评价.