化合物4h对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症的抑制作用及机制研究

目的:探讨化合物4h对脂多糖(LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞炎症的抑制作用.方法:小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7经LPS诱导建立炎症模型,实验分为空白组、对照组、阳性罗格列酮组(5,10μmol·L-1)、阳性吲哚美辛组(5,10μmol·L-1)、4h组(5,10μmol·L-1),采用酶联免疫吸附实验测定目标化合物4h对于炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)分泌的影响;实验分为空白组、对照组、4h组(5,10μmol·L-1),采用蛋白免疫印迹实验测定目标化合物4h对于信号通路Toll样受体4/核因子κB(TLR4/NF-κB)蛋白的表达水平.结果:与空白组比较,LPS作用后,对照组TNF-α含量显著升高(P<0.01),并且随着LPS作用时间的延长,TNF-α含量随之升高.加入化合物处理后,各实验组TNF-α含量呈下降趋势,与对照组比较,化合物4h各时间点的TNF-α含量差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),随着化合物浓度的升高,炎症因子的含量逐渐下降.化合物4h对TNF-α的抑制作用明显优于两个阳性对照药罗格列酮和吲哚美辛(P<0.05或P<0.01).与空白组比较,LPS作用后对照组RAW264.7细胞中IκBα蛋白表达水平显著降低,TLR4、p-NF-κB p65和p-IκBα蛋白表达水平显著升高(P<0.01).与对照组比较,4h作用后实验组RAW264.7细胞中IκBα蛋白表达水平显著升高,TLR4、p-NF-κB p65和p-IκBα蛋白表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01).结论:4h通过抑制信号通路TLR4/NF-κB蛋白的表达,进而抑制炎症因子TNF-α的产生,从而发挥抗炎作用.