一测多评HPLC法测定三叶青中5种黄酮类成分的含量

目的:建立HPLC一测多评法(QAMS)同时测定三叶青中芦丁、异槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山奈酚5种黄酮类成分.方法:色谱柱:Agilent ZORBAX SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.2％磷酸溶液,梯度洗脱;流速:1.0 ml·min-1;检测波长:360 nm;柱温:35℃;进样量:10μl.以芦丁为内参物,分别建立其与异槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山奈酚间的相对校正因子(RCF),并计算三叶青各成分含量,实现一测多评.结果:芦丁与异槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素和山奈酚的RCF分别为0.918,3.922,0.082,0.088,RSD分别为1.30％,0.63％,3.88％,1.12％(n=13);17批三叶青中以芦丁为参照物,另外4种黄酮类成分的含量用一测多评法测定结果与外标法测定结果相对误差<5％.结论:以芦丁为参照,采用QAMS能同时测定三叶青中5种黄酮类成分的含量,该方法可靠,结果准确,可用于三叶青药材的质量控制.