定量1H-NMR法测定6B,10A,17F,19A,19F及20型肺炎链球菌荚膜多糖含量

目的:建立一种测定6B,10A,17F,19A,19F及20型肺炎链球菌荚膜多糖含量的定量核磁共振氢谱(1H-NMR)法.方法:以二甲基砜为内标物,采用Bruker Avance-600型核磁共振波谱仪,设置检测条件,建立定量1 H-NMR法用于供试品溶液的测定.结果:获得各型多糖的1H-NMR谱图,确定用于定量的特征峰.通过比较各型多糖特征峰的峰面积与内标物特征峰的峰面积,计算得到6B,10A,17F,19A,19F及20型肺炎链球菌荚膜多糖含量依次为92.57％,88.56％,84.95％,82.92％,83.98％和85.80％,计算各组数据的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)值依次为0.29％,0.47％,0.48％,0.13％,0.38％和0.22％.结论:本研究建立的测定肺炎链球菌荚膜多糖含量的定量1H-NMR法,从样品制备到采样参数设置以及数据处理,操作简单,可行性高,重复性好,更能够满足检定工作的需求,可作为肺炎球菌荚膜多糖质量控制的一种合理、有效的技术手段.