CWPS竞争ELISA检测方法的建立

目的:建立竞争酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定C-多糖(Cell Wall Polysaccharides,CWPS)浓度的方法.方法:以C-多糖为包被抗原,待测多糖为竞争抗原,与优化的抗C-多糖抗体反应,建立标准曲线,并验证该方法的准确性和精密度.结果:优化后的C-多糖包被浓度为10 μg· mL-1,抗C-多糖血清稀释度为1∶160 000.检测线性范围1250～20 ng· mL-1,最低检测限为10ng· mL-1,回归方程为B/B0=-0.2521 lg[CWPS] +0.9529,线性相关系数为R2=0.99.批内和批间精密度分别为9.7％和6.9％,测定PS6A精糖中标准CWPS的回收率为100.3％.结论:本研究建立的竞争ELISA方法,准确性和精密度均较好,可以检测肺炎链球菌荚膜多糖中CWPS的浓度.