贝母甲素对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 研究贝母甲素对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用及其机制.方法 将SD大鼠随机分为5组:正常组,模型组,贝母甲素2.5、5、10 mg组,每组15只大鼠.采用大脑中动脉线栓法制局灶性脑缺血模型,贝母甲素给药组大鼠在手术前10d每日分别灌胃贝母甲素2.5、5、10 mg·kg-1,在手术24 h后再连续3d分别灌胃贝母甲素2.5、5、10 mg·kg-1.正常组和模型组在同一时间灌胃等量生理盐水.给药结束后进行神经功能评分,HE染色观察脑组织损伤,检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)的含量,免疫组化法检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达,EHSA法检测白细胞介素(IL)-6、IL-18和IL-1β的含量,Western blotting法检测caspase-9、caspase-3、bax、bcl-2、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、beclin1、p62、PI3K、Akt和mTOR蛋白的表达.结果 正常组大鼠神经功能评分为0分,模型组神经功能评分为(2.8±0.4)分.与模型组相比,贝母甲素2.5、5、10 mg组大鼠的神经功能评分显著降低(P＜0.05),脑组织形态得到改善;caspase-9、caspase-3、bax表达显著下调,bcl-2表达显著上调(P＜0.05);MDA和LDH含量显著降低,SOD含量显著升高(P＜0.05);ICAM-1阳性细胞比率显著降低,IL-6、IL-18和IL-1β的含量明显降低(P＜0.05);p62、PI3K、Akt和mTOR表达明显下调,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和beclin1表达明显上调(P＜0.05),且效果随着给药量的增加而呈增强趋势.结论 贝母甲素对大鼠脑缺血再灌注损伤起保护作用,减轻病理损伤和神经功能障碍,这可能与其抑制细胞凋亡、氧化应激和炎症反应,调节PI3K/Akt/mTOR自噬通路有关.