结核分枝杆菌对PA-824耐药的体外诱导及稳定性研究

目的 体外诱导并获得结核分枝杆菌(MTB)对PA-824的耐药菌株.方法 选取MTB标准株H37Rv,在PA-824浓度二倍递增的含药培养基上进行传代培养,逐步诱导菌株对PA-824耐药,测定多种抗结核药物对PA-824耐药株的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),并对耐药株测序鉴定ddn和fgd1基因的突变情况.将耐药株在无药固体培养基上连续传代培养10代以观察耐药稳定性.结果 H37Rv经逐步诱导后得到5株MTB单克隆,它们对PA-824的MIC值是诱导前8倍以上,且对TBA-354同时发生交叉耐药.测序结果显示fgd1基因未发生突变,但5株均检测到ddn基因突变.耐药株在无药固体培养基上连续传代10代后,MIC值无明显变化.结论 通过二倍递增体外诱导可以获得对2种硝基咪唑类(nitroimidazoles)药物均耐药的MTB菌株;MTB对硝基咪唑类药物的耐药可能与ddn基因突变有关;MTB对硝基咪唑类药物的耐药稳定性较强,不易复敏.