二维色谱法测定癫痫患者血清中苯妥英的浓度

目的:采用二维色谱(2D-LC-UV)法测定血清中苯妥英的浓度,用于临床癫痫患者苯妥英血清药物浓度检测.方法:400 μL样品进样,在一维色谱柱MVV-1D(4.6 mm×25 mm,5 μm)上初步分离,通过萃取柱ASTON MSS C18(4.0 mm×10 mm,3 μm)截取保留含有苯妥英的馏分片段,并在二维色谱柱Agilent Extent-C18(4.6 mm×150 mm,5 μm)上进一步分离,最终完成测定.一维色谱流动相为乙腈-水(52:48,v/v),中间柱流动相为纯水,二维色谱流动相为乙腈-20 mmol·L-1乙酸铵(50:50,v/v,pH=7.0);一维色谱流速为1.0 mL·min-1,二维色谱流速为0.8 mL· min-1;柱温为40℃,紫外检测波长为220 nm.采集10名癫痫患者苯妥英稳态谷浓度血清样本测定.结果:在建立的色谱条件下,苯妥英与各杂质分离良好,线性范围为1.26~80.57 μg·mL-1,检测限为1.26 μg·mL-1.10名癫痫患者血清苯妥英浓度平均值为17.00 μg·mL-1.结论:此法操作适用于苯妥英浓度-药效研究及临床监测.