白果内酯通过Nrf2/HO-1信号通路改善氧化应激所致体外血脑屏障损伤的研究

目的 研究白果内酯对过氧化氢(H2O2)所致体外血脑屏障损伤的保护作用及其机制.方法 hCMEC/d3与HEB细胞共培养建立体外血脑屏障模型,模型分为6组:空白对照组、H2O2模型组(500μmol/L)、白果内酯低中高剂量组(0.2、1、5μmol/L)、依达拉奉(10μmol/L)阳性组.给予不同浓度白果内酯及依达拉奉预处理体外血脑屏障模型24 h,利用H2O2(500μmol/L)诱导2 h模拟氧化应激损伤.采用CCK-8法检测细胞活性,同时检测血脑屏障模型一氧化氮(NO)、还原型谷胱甘肽(GSH)、乳酸脱氢酶(LDH)及总抗氧化能力;考察跨内皮细胞电阻值及荧光素钠(Na-F)透过率;蛋白免疫印迹检测紧密连接蛋白(claudin-5、occludin、VE-Cadherin)和抗氧化蛋白(Nrf2、HO-1)的表达水平.结果 氧化应激会引起体外血脑屏障通透性的增加,下调紧密连接蛋白表达水平.白果内酯预处理可提高内皮细胞总抗氧化能力及NO、GSH水平,降低LDH水平,维持细胞正常的电阻值及较低的Na-F的透过,同时缓解氧化应激引起的紧密连接蛋白下调,并上调Nrf2/HO-1信号通路抗氧化蛋白表达.结论 白果内酯可作用于抗氧化信号通路Nrf2/HO-1保护氧化应激所致血脑屏障通透性增加.