SNAI1对内胚层分化命运和细胞迁移能力的影响

目的 通过在人胚胎干细胞定向分化为定型内胚层过程中,干扰SNAI1基因的表达,观察其对细胞命运及迁移运动能力的影响.方法 采用激活素A诱导人胚胎干细胞向定型内胚层细胞分化,实验分为两组:对照组转染阴性对照siRNA,实验组转染siSNAI1.通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹鉴定siSNAI1的干扰效果;通过qRT-PCR和细胞免疫荧光检测定型内胚层标志物的表达情况;通过细胞划痕实验测定细胞的迁移运动能力.结果 由于siSNAI1的干扰作用,细胞内SNAI1的mRNA含量显著降低,SNAI1蛋白的表达受阻;干扰SNAI1的表达会显著抑制定型内胚层标志物FOXA2、GATA4、GATA6以及细胞迁移运动有关基因TGFβ1、KLF8的表达,细胞的迁移能力下降.结论 SNAI1决定内胚层分化效率和细胞迁移能力的获得.