4-氨基吡啶抑制肺癌细胞SPCA1及PC9增殖及其分子机理的研究
Journal of Guangdong Pharmaceutical University(2016)
Abstract
目的 探讨4-氨基吡啶(4-AP)对肺癌细胞增殖的影响及分子机制.方法 浓度为0、0.195、0.39、0.78、1.56、3.125、6.25、12.5、25 mmol/L的4-AP分别处理SPCA1和PC9细胞48 h,MTT法测定4-AP对肺癌细胞的抑制率及IC50.浓度为0、4.7或0、6.25 mmoL/L的4-AP分别处理SPCA1和PC9细胞0、24、48、72 h或14d或48 h,MTT法测定肺癌细胞的增殖率或平板克隆形成实验测定肺癌细胞的增殖或流式细胞仪检测细胞周期.浓度为0、3、4.7或0、3.125、6.25 mmol/L的4-AP分别处理SPCA1和PC9细胞48 h,利用Western blot检测PI3K/AKT信号通路和细胞周期相关蛋白.结果 MTT结果显示,4-AP浓度越高,对肺癌细胞增殖的抑制越强,SPCA1和PC9细胞的IC50分别为4.7 mmol/L和6.25 mmol/L.MTT法显示,4-AP组细胞生长速度减慢(p<0.01).平板克隆结果显示,与对照组相比,4-AP组细胞平板克隆小且数量少(P<0.05).流式细胞仪检测细胞周期显示,4-AP组细胞G1期比例增多(P<0.05).Western blot结果显示,与对照组相比,4-AP组细胞中,P21表达上调,p-PI3K (Tyr458)、p-AKT(Ser473)、CCND1和CDK4表达下调,PI3K和AKT表达不变.结论 4-AP抑制肺癌细胞生长,且4-AP可能通过调控PI3K/AKT信号通路及下游细胞周期相关蛋白的表达.
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4-AP,NSCLC,growth
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