高效液相色谱法测定大鼠和人血浆中坦西莫司的蛋白结合率

目的 建立高效液相色谱法测定坦西莫司在大鼠和人血浆中的含量,并结合超滤法测定坦西莫司的血浆蛋白结合率.方法 色谱柱为Inertsil ODS-SP C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.5％冰醋酸(65∶35,V/V),检测波长为277 nm,柱温为40℃,流速为1.0 mL·min-1.结果 坦西莫司在0.26～21.58 mg·L-1浓度范围内与峰面积线性关系良好(R＞0.999 5),定量下限为0.086 mg·L-1,坦西莫司大鼠血浆样品的平均提取回收率为(96.70±0.57)％(RSD为0.59％),坦西莫司人血浆样品的平均提取回收率为(96.33± 1.54)％(RSD为1.60％).坦西莫司在2.57,5.15,10.29 mg· L-1浓度水平与大鼠的平均蛋白结合率为(87.48±0.61)％,与人血浆的的平均蛋白结合率为(85.31±0.63)％.结论 该法操作简便、快速灵敏,能满足坦西莫司血药浓度的测定.在试验研究浓度范围内,血浆蛋白结合率与药物浓度无关,坦西莫司与大鼠和健康人血浆均有较高强度结合,坦西莫司与大鼠的血浆蛋白结合率高于人血浆(P＜0.05).