四氢小檗碱对过氧化氢致前成骨细胞MC3T3-E1氧化损伤的防治作用及机制探讨

目的 观察四氢小檗碱对过氧化氢致前成骨细胞MC3T3-E1氧化损伤的影响,并探讨相关机制.方法 建立体外MC3T3-E1细胞氧化应激模型,将细胞随机分为H2O2+1μmol·L-1四氢小檗碱组;H2O2+0.1μmol·L-1四氢小檗碱组;H2O2+0.01 μmol·L-1四氢小檗碱组;H2O2+N-乙酰半胱氨酸(NAC)1 mmol·L-1组;H2 O2模型对照组;空白对照组.MTT法检测细胞活力;荧光显微镜观察活性氧(ROS)含量;比色法检测丙二醛(MDA)含量;流式细胞术检测细胞凋亡率;Real time-PCR和Western-blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达情况.结果 与空白对照组比较,单纯H2O2处理组细胞活性明显降低,凋亡率及ROS、MDA含量明显增加;同时Bcl-2 mRNA和蛋白表达明显下调,Bax mRNA和蛋白表达明显上调(P＜0.05).与H2O2模型对照组比较,四氢小檗碱能够明显增强细胞活性,降低细胞凋亡率及ROS、MDA含量,上调Bcl-2 mRNA和蛋白表达,下调Bax mRNA和蛋白表达,并且呈剂量依赖性(P＜0.05).结论 四氢小檗碱对H2O2介导MC3T3-E1细胞的氧化损伤具有保护作用,其机制可能与降低细胞内MDA和ROS的水平相关.