柴胡皂苷-b2对HepG2细胞迁移及血管生成相关蛋白表达的影响

目的 研究柴胡皂苷b2(SS-b2)对HepG2细胞迁移的影响,并探讨其潜在的分子机制.方法 用MTT法检测SS-b2对HepG2细胞存活的影响,并根据结果将细胞分为细胞对照组、SS-b2治疗组(15,30和60 mg·L-1)和阳性对照组〔多柔比星(DOX)2 mg·L-1〕;利用划痕实验观察SS-b2对HepG2细胞迁移的影响;采用Western印迹法检测HepG2细胞中血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9的表达和细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)的磷酸化水平.结果 SS-b215,30和60 mg·L-1处理HepG2细胞48 h后,划痕愈合率分别为74.71％,72.50％和66.82％,随着SS-b2浓度的增加,划痕愈合率明显减小.与细胞对照组相比,SS-b230和60 mg·L-1组的划痕愈合率显著降低(P<0.05);SS-b215,30和60 mg·L-1可显著降低HepG2细胞中VEGF和HIF-1α的表达(P<0.05,P<0.01),而SS-b260 mg·L-1可显著降低MMP-2和MMP-9蛋白的表达以及ERK1/2的磷酸化(P<0.05,P<0.01);阳性对照组可显著降低上述4种蛋白的表达以及ERK1/2的磷酸化(P<0.05,P<0.01).与阳性对照组相比,SS-b260 mg·L-1下调VEGF和MMP-2的表达更显著(P<0.05,P<0.01),SS-b215,30和60 mg·L-1对HIF-1α的表达与阳性对照组无显著性差异,对MMP-9蛋白表达的下调不如阳性对照组效果显著(P<0.01),SS-b260 mg·L-1与阳性对照组的ERK1/2磷酸化程度无显著性差异.结论 SS-b2可以抑制HepG2细胞的迁移,该作用可能与其抑制血管生成通路相关蛋白的表达有关.